AF488 NHS,Alexa Fluor 488活性酯的偶联反应机制
AF488 NHS Ester,即 Alexa Fluor 488 N-羟基琥珀酰亚胺酯,是一种基于高性能荧光团Alexa Fluor 488的活性酯标记试剂。Alexa Fluor 488(简称AF488)属于磺基荧光染料家族,是一种具有优异光学性能和化学稳定性的绿色荧光染料。
NHS酯的微动物构成使其就能高效能地与高蛋白质、肽、抵抗能力、核酸等微动物大分子的伯胺基团造成共价键,很广选用于微动物图标、组织体细胞显像、免疫性印迹组织体细胞术各种免疫性数据分析等设计教育领域。偶联不起作用规则AF488 NHS Ester利于其可溶性的NHS酯基团与靶团伙中的伯胺基团(如蛋清质中赖氨酸侧链的氨基)来进行亲核转变成症状,添加增强的酰胺键,建立共价符号。反映状态:经常在pH 7.4–8.5的缓解液(如PBS、碳酸氢盐缓解液)中做好表现期限:室内温度下表现30分鐘至1几小时现象优缺点:高、缜密,现象温暖,防止出现靶大分子式特征严重破坏关注细节:症状的过程 中应解决悬浮氨基和含水量太多尽可能的防止发动机组升温NHS酯油脂水解
蛋白质标记
AF488 NHS Ester可标记蛋白质上的赖氨酸残基,用于免疫荧光染色、蛋白定位、Western blot分析和亲和纯化。
抗体偶联
标记一抗或二抗,获得荧光抗体,广泛应用于免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)及流式细胞术(FACS)。
核酸探针制备
与含氨基修饰的寡核苷酸结合,制备高灵敏度的荧光探针,用于荧光原位杂交(FISH)和PCR探针。
细胞成像
利用其绿色荧光信号标记细胞膜、胞器或特定蛋白,实现多色荧光共聚焦显微镜成像。
生物传感器和分子相互作用
标记分子用于研究蛋白-蛋白、蛋白-核酸等生物大分子的相互作用及动力学。


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