AF488 NHS,Alexa Fluor 488活性酯的偶联反应机制
AF488 NHS Ester,即 Alexa Fluor 488 N-羟基琥珀酰亚胺酯,是一种基于高性能荧光团Alexa Fluor 488的活性酯标记试剂。Alexa Fluor 488(简称AF488)属于磺基荧光染料家族,是一种具有优异光学性能和化学稳定性的绿色荧光染料。
NHS酯的可溶性结构设计使其都可以效率高地与血清质、肽、表面抗原、核酸等微生物体脂溶性式的伯胺基团达成共价键,丰富技术应用于微生物体标注、受损细胞膜激光散斑、流式细胞膜术受损细胞膜术已经免疫系统数据分析等科研的领域。偶联发生反应机能AF488 NHS Ester应用其活力性的NHS酯基团与靶碳原子中的伯胺基团(如蛋白酶质中赖氨酸侧链的氨基)开始亲核抗衡不起作用,转换保持稳定的酰胺键,建立共价标出。现象状态:一般性在pH 7.4–8.5的缓存液(如PBS、碳酸氢盐缓存液)中采取症状准确时间:恒温下症状301分钟至1半小时体现性能:便捷、爱情专一,体现一个温和,减少靶分子式型式受损主要注意问题:反馈过程中 中应不要解离氨基和油分过少预防NHS酯电离蛋白质标记
AF488 NHS Ester可标记蛋白质上的赖氨酸残基,用于免疫荧光染色、蛋白定位、Western blot分析和亲和纯化。
抗体偶联
标记一抗或二抗,获得荧光抗体,广泛应用于免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)及流式细胞术(FACS)。
核酸探针制备
与含氨基修饰的寡核苷酸结合,制备高灵敏度的荧光探针,用于荧光原位杂交(FISH)和PCR探针。
细胞成像
利用其绿色荧光信号标记细胞膜、胞器或特定蛋白,实现多色荧光共聚焦显微镜成像。
生物传感器和分子相互作用
标记分子用于研究蛋白-蛋白、蛋白-核酸等生物大分子的相互作用及动力学。