Cy3-dCTP,花菁类荧光染料CY3共价连接至脱氧胞苷三磷酸的反应步骤
Cy3-dCTP,花菁类荧光染色剂CY3共价连到至脱氧胞苷三磷酸的反應步驟
Cy3-dCTP 是将花菁类荧光染料 CY3 共价连接至脱氧胞苷三磷酸(dCTP)分子上的荧光核苷酸衍生物,应用于分子生物学实验,如荧光原位杂交(FISH)、荧光PCR、DNA合成标记、测序等。该标记形式通过在碱基或糖环结构上引入荧光团,实现对核酸合成或模板识别过程的可视化分析。
CY3-dCTP 的结合基本应用核苷酸装饰措施,在始终维持 dCTP 三磷酸骨架运输安全性的条件上,添加一链接基团(如氨基烷基链或氨基酯链)当做活性染料偶联位点。经常用到的措施是在 dCTP 的 5-位碱基上添加氨基链(如 aminoallyl-dCTP),再经过与 CY3-NHS 酯实现之后装饰出现酰胺键。大概发生反应步聚正确:转化成氨基突显核苷酸:以脱氧胞苷为初始物,在在其C5位引用一种氨基烷基侧链,达到 aminoallyl-dCTP。该中心体既实现核苷酸原来的碱基匹配程度,又引用一种生动伯胺,适用随后标签。CY3-NHS 酯准备与碱化:CY3可以通过与N-羟基蜜腊酰亚胺反映建立NHS活酯,使染剂配备与胺反映的力。该酯在非常干燥有机化学dmf溶剂(如DMSO)中配置,以确保其可溶性。偶联现象:将 aminoallyl-dCTP 消融于碳酸盐抗震液(pH 8.5),假如合适的 CY3-NHS 酯(基本以1.2–1.5倍摩尔量),在阴凉先决条件下温顺现象 2–4 钟头,出现安全稳定的 CY3-dCTP。整体环节需严苛逃避金屬阳离子区域破坏和强硫化区域,以免止核苷酸可降解。纯化进程:现象后操作阳离子交易色谱或反相HPLC分割纯化,出掉未现象有机染料、缓解盐及副代谢物。纯品可进十步冻干导出,保持其三磷酸形式安全稳定。判定与补充:经由质谱、核磁共震(NMR)及紫外光-可以说光谱仪(UV-Vis)来格局签别,判定荧光团非常成功转化。CY3-dCTP 需冰冻阴凉补充(-20°C如下),以长期保持荧光刚度及核苷酸安稳性。该标志核苷酸可被DNA聚合物酶判断并掺进新人工的链中,留下其荧光性能,应中用高迅敏度的氧分子跟踪试验所,极具的试验所室软件应用社会价值。产品名称:Cy3-dCTP,花菁类荧光染色剂CY3共价无线连接至脱氧胞苷三磷酸
色度:95%+特性:固态或液滴储放情况:-20°C缺水闭光同步保存再生标准:50mg 100mg 250mg 500mg(按需展示 )制造厂家:pg电子娱乐游戏app 生物制品仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.06.23