花菁素染料Cyanine标记丝素蛋白 CY5-Silk fibroin的实验步骤

实验步骤

丝素蛋白的预处理

融掉：将丝素球蛋白融掉于尽可能的降低液（如PBS）中，浓度值一般为1-10 mg/mL。纯化：在透析或柱层析快速清理杂质残渣，保障丝素球蛋白的溶解度。Cyanine染色剂的活性NHS酯产甲烷：将Cyanine染剂的NHS酯降解于无水DMF或DMSO中，下载三乙胺（TEA）看做催化氧化剂，常温背光作用30分。

偶联反应

具体状态：将碱化的Cyanine活性染料与丝素球蛋白在弱强碱具体状态（pH 8.0-9.0）下混合型，空调温度背光掺和4-8小时左右。摩尔比：Cyanine染色剂与丝素蛋白质的摩尔比通常情况下为1:1至5:1，保证科学规范标记图片。

纯化

透析：运用虚报冒领团伙结构量应当的透析袋（如30 kDa），出掉未作用的Cyanine活性染料和一些小团伙结构悬浮物。柱层析：进行妇科凝胶覆盖色谱（GPC）进一大步纯化，确保结果的纯净度。小编公司可展示 相关的的私人订制品牌，知悉可以，请顾问，谢谢了！

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