英文名称:Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AFC
中文名称:乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-三氟甲基香豆素
乙酰-天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸-7-氨基-4-三氟甲基香豆素(Ac-Asp-Glu-Val-Asp-AFC,简写Ac-DEVD-AFC)不是种荧光标上的四肽底物,專用于查重半胱天冬酶-3(Caspase-3)及Caspase-7的酶活力。其型式中,N端乙酰基(Ac)制止肽链降解塑料,天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸(DEVD)回文序列为Caspase-3/7的活性聊天裁割机位点,pc端7-氨基-4-三氟甲基香豆素(AFC)做荧光基团,在未被裁割机时若共轭型式荧光严重不足,酶切后宣泄存在AFC,其荧光程度(促进光的主波长400 nm,导弹发射光的主波长505 nm)不错增加,可经由荧光分光光度计或细孔板阅读文章器一定量查重。Caspase-3/7是肿瘤神经元膜凋亡连接时期的价值体系蛋白酶酶,其可溶性酶变现可反映落实凋亡预警环路的提高情形。Ac-DEVD-AFC经由提拱高灵巧度的荧光检则的方式,加入设计肿瘤神经元膜凋亡新机制的决定性交通工具。举例说明,在中枢周围神经退行性皮肤疾病建模 中,可经由衡量脑策划 匀浆中Caspase-3/7对Ac-DEVD-AFC的切割器可溶性酶,分析评估中枢周围神经元凋亡系数;在类药毒素评论中,该底物可以用在于检则类化合物是不是也经由引导凋亡会导致肿瘤神经元膜意外死亡。Ac-DEVD-AFC的运行需优化系统实验操作条件以加快精确性。假如,发生反应迟钝保护液需分为适度密度的DTT以维系酶特喜欢的人氧,互相避免出现过高密度控制荧光判断;发生反应迟钝环境温度(一般 37℃)当即间需基于样品种类调节,以确保安全生产荧光手机数据信息与酶特喜欢的人氧呈直线联系。除外,需用生成特喜欢的人控注射剂(如Ac-DEVD-CHO)查验手机数据信息特喜欢的人,清除其它的球蛋白酶的控制。阶段,Ac-DEVD-AFC已具有广泛性APP于受损细胞海洋生理学、药剂学学及常见疾病学钻研,为明白凋亡有关常见疾病的原子核原则具备了要点系统承重。

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