Cy5-Protein A,花菁素CY5-蛋白A的合成路线
物料称谓:Cy5-Protein A,花菁素CY5-蛋清A的合出线路
合成与纯化
分解路径:
Protein A碱化:进行还原成剂(如DTT)访问Protein A的二硫键,曝露半胱氨酸残基(如要马来酰亚胺标志)。或直接的施用赖氨酸残基(pH 8.0-9.0的条件下)与Cy5-NHS酯响应。Cy5箭头:Cy5-NHS酯与Protein A的氨基(赖氨酸ε-NH₂)发生反应,出现稳定性酰胺键。生理反应具体条件:PBS(pH 7.4),室内温度,1-2个小时,背光。纯化:凭借脱盐柱(如Zeba Spin)我们要除未体现Cy5,或凭借寸尺排阻色谱(SEC)分开记号物质。饱和度规范要求:>95%(HPLC或SDS-PAGE的检测)。主要叁数:
标注度(Dye:Protein ratio):往往为1:1至3:1,过高记号机会影响Protein A构象改进,减少IgG搭配技能。荧光量子成品率:图标后Cy5的量子劳动生产率应≥0.2(随心所欲Cy5约为0.28),有效确保走势密度。大家品牌可提供数据对应的个性定制新产品,见谅可以,请资询,谢谢了!