用于膜功能研究的DOPE-PEG-Biotin修饰巨型囊泡制备工艺
医学文献:脂质膜上的水分子安装有效途径图片链接://www.cell.com/biophysj/fulltext/S0006-3495(17)30844-5小说作者:卡斯珀·范德韦尔1 ∙ 多丽丝·海因里希1,2 ∙ 丹妮拉·J·克拉重夫特1 节选:膜分离纯化用标淮电胀大技术设备(14)制法了直徑在5至20廊坊可耐电器有限公司区间内的超大型单双层囊泡(GUVs)。在氯仿中配比了2克/升的脂质混和物,在这其中是指97.5含水量%的二油酰磷脂酰胆碱(DOPC)、2.0含水量%的聚乙二醇-聚氧乙稀醚-生物制品素(DOPE-PEG-biotin)和0.5含水量%的聚乙二醇-罗丹明(DOPE-rhodamine)。现在来,在俩个6平米CM的被氧化铟锡涂膜载玻片(15–25 μm,Sigma-Aldrich)上各常温、干燥10微升该稀硫酸,继而渗透到有100毫摩尔提子糖和0.3毫摩尔叠氮化钠的49:51重水:水稀硫酸中。为促进囊泡演变成,电*在10赫兹下释放1.1伏(均方根值)输出功率2小时左右。对此赚取的囊泡在温度下存储在牛血清廉核蛋白包被的小瓶中。为减低较小囊泡的总数,各位在应用前可以直接用Whatmann 5.0廊坊可耐电器有限公司口径的盐酸化学大豆蛋白滤膜滤过GUV稀硫酸(15)。这对于膜管化调查,应用周围神经节苷脂GM1和纺织染料霍乱黑色素488更好地部膜叶做出刺绣,实际的办法流程给出:将作出氯仿中的脂质混和物更换到甲醇中,加盟0.2含水量%的GM1。然后呢按作出的办法做出电胀大。在印刷品制法前,向磷酸二氢钠响应建议使用淡盐水配合(PBS)添加盟50毫克/升的霍乱黑色素488,仅对囊泡的其他叶做出刺绣。