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发布时间:2025-07-17     作者:zyl   分享到:

FITC(Fluorescein Isothiocyanate)是一种广泛使用的荧光染料,是荧光素(Fluorescein)衍生的异硫氰酸酯活性化合物,具有良好的荧光性质和反应活性,常用于标记蛋白质、多肽、抗体、氨基寡核苷酸等含胺类生物分子。

FITC 就是种蓝色荧光纺织染料,在培养吸光度约为495 nm(蓝光培养)时可发送520–530 nm的蓝色荧光,有着高量子产出率和健康的三维成相对比分析度,是荧光标志和三维成相这个领域的著名平台分子式。

常用名荧光素

英文名fluorescein

CAS号518-45-6

分子量332.30600

分子式C20H12O5

熔点N/A

FITC

结构特性

FITC是荧光素的异硫氰酸酯并衍生物,当中异硫氰酸酯基团(–N=C=S)体现其与伯胺(–NH₂)想法的效率。种想法基本上在碱先决条件(pH 8.0~9.0)下做出,可与氨基进行不稳的硫脲键,然后满足分子式的共价标签。FITC有不同异构体:5-FITC 和 6-FITC,其中的5-FITC是选用的异构体,也常看做细则免疫试剂推广。商业运作上提供了的“FITC”大部分是5-FITC和6-FITC的混合式物。


反应活性与标记机制

FITC中的异硫氰酸酯基团可与伯胺类碳原子快速发展表现,在温顺具体条件下造成平稳的硫脲键。这使其将成为标识球氨基酸、抗原和寡核苷酸的完美首选。该表现步简便计算高效能,惯用响应液为碳酸氢盐响应液(pH 8.3)或聚磷酸盐响应液(PBS,调准至含碱)。标记图片顺利完成后,一般来说可以透析、疑胶过滤系统或HPLC等策略除掉未不起作用的FITC游离于纺织染料,以以减少后台移动信号。


主要应用领域

免疫荧光染色(Immunofluorescence, IF)
FITC可用于标记抗体,用于检测细胞或组织中的特定靶标。由于其绿色荧光信号清晰明亮,可被多种荧光显微镜检测系统识别。

流式细胞术(Flow Cytometry, FACS)
FITC标记抗体广泛用于流式细胞术中,用于检测细胞表面或胞内蛋白,便于实现细胞亚群分析或细胞活性评估。

蛋白质/多肽标记
FITC常用于标记酶、激素、受体、细胞穿膜肽等,用于追踪其生物分布和作用机制。

细胞追踪和示踪实验
通过FITC标记的物质可用于研究细胞的吞噬、摄取、转运、跨膜过程等。

荧光探针和传感器构建
FITC经常用于合成荧光比率探针或用于检测离子、pH、酶活性的传感系统。


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