6-FAM SE,92557-81-8,荧光素NHS活性酯类染料的结构合成
6-FAM SE,92557-81-8,荧光素NHS吸附性酯类染色剂的构造合出
6-FAM SE(6-Carboxyfluorescein N-succinimidyl ester)是荧光素(fluorescein)衍生的NHS活性酯类染料,其结构由荧光素分子主架与一个活化羧酸(羧基活性酯)相连,赋予其与氨基分子共价结合的能力。该染料用于核酸测序、寡核苷酸标记、蛋白质修饰及实时荧光PCR探针制备等领域。
其结构类型转化成自驾路线一般 以6-羧基荧光素(6-FAM)为起运量。首要在无水可挥发石油醚如DMF或DCM中,将6-FAM的羧基与N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC)或EDC碱化,再建立N-羟基蜜腊酰亚胺(NHS),添加有着表现吸附性的6-FAM-NHS酯,即6-FAM SE。该表现一般 在惰性积极性(氢气或氩气)中通过,以防止水分含量造成的的蛋白质水解,并能加入溶剂的作用剂如DMAP可以淡化表现通过。终产品为安全稳定的金属粉状橙浅黄色染色剂,其SE(NHS酯)基团在中性粒细胞或酸性规则下(pH 7.5–8.5)可更高效与伯胺反应迟钝演变成酰胺键。这使其特意适用于于寡核苷酸5'端标注、氨基装饰引物的荧光接枝及核苷酸并衍生物制作而成。致使FAM荧光预警很强烈、量子劳动生产率高且导弹发射激发光谱(约520 nm)与实用激光行业器兼容,故此是Illumina、ABI等测序app中的规则标注染色剂。型式上,6-FAM SE含有刚度平米二环共轭体统,使其荧光特点在共价偶联后仍增加动态平衡。在自动合成后的纯化阶段中,常按照反相HPLC按照色谱脱离,并按照MS与NMR询问其氧分子结构型式。其不错的化学物质动态平衡性与最易偶联属性,使其成為现代化氧分子结构生物体学中不宜或缺的荧光营造模块图片之三。英文版英语名称: 6-FAM, SE中文翻译名号: 6-羧基荧光素虎珀酰亚胺醚MF: C25H15NO9MW: 473.39CAS: 92557-81-8