基于DSPE-Biotin的脂质体固定策略用于层流通道实验
论文:截段流诱发的外观确定化脂质体的纳米级管化友链://pubs.rsc.org/en/content/articlehtml/2012/ra/c2ra00629d我:Yurina Sekine ab、 Keita Abe a、 Akitaka Shimizu a、 Yoshihiro Sasaki † * ac、 Shin-ichi Sawada d和 Kazunari Akiyoshi 节选:气体出入由一名密封的通路腔室(μ-Slides VI,ibidi GmbH,德国的慕尼黑)呈现,该腔室都可以逃避弯月面和烘干定律,因而在腔室流道的比较大的领域内施用饱满的层流分割流。该流道(亲水溶性;长 17 mm;宽 3.8 mm;高 0.4 mm)应中用三个储液器中,储液器利用鲁尔直接头和透明硅胶管接入到算出机操作的滴注泵(REGATO 100,KD Scientific,加拿大马萨诸塞州霍利斯顿)(图 1a )。巨形脂质体利用亲和素-动物素主动效果比较确定在该腔车间内(图 1b),首要与论文所讲相符。12简而言的之,将流道放满白核蛋白牛动物素酰胺己酰 (BSA-动物素) 液体 (2 mg mL −1溶解HEPES 减慢器液中,10 mM,pH 7.4),孵育 10 分种左右,第三用HEPES 减慢器液擦洗,受到动物素包被的通路。此历程重叠1次,直腔室外层全部被动物素-BSA 复盖,如前所讲。13第三将溶解HEPES 减慢器液的链霉亲和素 (II 型,1 mg mL −1 )加入到动物素包被的通路中,并在 40 分种左右内吸。*后,用HEPES 减慢器液擦洗通路1次。将由各种不同摩尔比的1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DOPC) 和动物素绘制的磷脂(1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺-N- [动物素基(聚乙二醇)-2000],DSPE-动物素) 組成的巨形脂质体构建流道,静置 10 分种左右,使脂质体比较确定在通路内内壁。利用在低聚果糖液体14中轻柔水化脂质塑料薄膜来制取巨形脂质体,连在一起一点 (0.5 mol%) 荧光脂质探头标出脂质体的三层,中用荧光显微镜检测(增配 DP70 彩色的CCD 摄影机的Olympus IX71落射荧光显微镜,日本地区 Olympus)。



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