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Cy5-DOPE在细胞膜荧光示踪中的应用与特性分析
发布时间:2025-07-09     作者:kx   分享到:
学术论文:具备着PD-1膜蛋清的协同混合法内部外囊泡代替胞质物料物流运输的链接://www.mdpi.com/2072-6694/14/11/2635小说家:石川拉贺†奥西德,吉田章介‡,泽田新一,佐佐木义弘和秋吉一成*节选:的材料杆状病毒有哪些传达装置经常用的秋粘虫Spodoptera frugiperda的Sf9虫类血细胞系系购自Invitrogen集团(美式加利福尼亚州沃尔瑟姆)。HeLa血细胞系购自JCRB Bank(法国分析微生物影视资源储藏管理中心,法国大阪)。 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DOPC)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸- L -丝氨酸 (DOPS)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺- N -(菁 5) (Cy5-DOPE)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺- N -(7-硝基-2-1,3-苯并恶二唑-4-基) (NBD-DOPE) 和 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺- N -(丽丝胺罗丹明 B 磺酰基) (Rho-DOPE) 均购自 Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL, USA)。脂质构成备将DOPC、DOPS、NBD-DOPE、Rho-DOPE和Cy5-DOPE以差异的摩尔比在玻璃纸微管上的氯仿中混杂。在游动的氩气下减压蒸馏相转移催化剂,演变成脂质膜。将膜置入真空泵潮湿器中包夜,以非常避开氯仿。建立250 µL加载液(20 mM CH3COOH/CH3COONa(pH 4.5)或10 mM Tris-HCl(pH 7.5))使膜水合,并在27 °C下孵育包夜。用的小型空气开关挤压机(Avanti Polar Lipids)将透明桌面液挤压100 nm直径的聚碳酸膜。用的磷脂C测评(Wako,印度大阪)測量脂质盐氧化还原电位。简衡量之,磷脂酶D和胆碱氧化的反应的的的酶从磷脂合格品中诞生过氧化的反应的的的氢。诞生的过氧化的反应的的的氢在过氧化的反应的的的物酶的功用下推动N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(DAOS)与4-氨基安替比林进行缩合的反应,导出天蓝色染色剂,使用检测该染色剂的吸光度,可以检测合格品中的磷脂盐氧化还原电位。

Cy5-DOPE

三维成像流式癌细胞术癌细胞术PD-1 EVs 用 5- 或 6-( N-琥铂酰亚胺氧羰基)荧光素 3′,6′-二乙酸酯 (CFSE)印染。将 CFSE 添加图片到 PD-1 EVs 浮悬液中,使其终氨水浓度为 62.8 µM,随后在 37 °C 下孵育 30 1小时。想要剔除解离的 CFSE,操作 100,000 NMWL Amicon 超离心法滤过器(Merck Millipore,荷兰马萨诸塞州伯灵顿)刷洗标识的 PD-1 EVs。以 100:100:1 的 DOPC、DOPS 和 Cy5-DOPE 摩尔比提纯脂质体。将 CFSE PD-1 EVs(5 µg/mL)和 Cy5 脂质体(1 µM)在强酸或普通水平下混后,并在 27 °C 下孵育 30 1小时。利用加如与反响迟钝溶剂等质量的pH 7.5缓冲区液停止重构反响迟钝。PD-1杂合胞体内膜利用100nm内径的膜熔融挤出。操作ImageStream x MkII(Merck Millipore)终端采集工具PD-1杂合胞体内膜的多光谱仪图象。机光耗油率设为为*大值(488nm:200mW;642nm:150mW;785nm(侧向散射):70mW)。荧光表现在节点2(CFSE)或节点5(Cy5)中处理。节点1和节点6各设为为明场和侧向散射。在40倍拖动数倍下终端采集工具10,000个a粒子的荧光承载力,并操作IDEAS 6.2电脑软件实施概述。西安市pg电子娱乐游戏app 微生物给出一些成品:cRGD(c[RGDfK])-PEG-DSPEcRGD-PEG-SHRVG29-PEG-DSPEVIP-PEG-DSPEm-PEG8-DSPEDSPE-Fluorescein/DSPE-FITCDSPE-PEG-CHEMS及以上一篇文章相关内容源于分类刊物或文献综述,如果发现侵犯肖像权请联系起来自己删出!