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Cy5-DOPE在细胞膜荧光示踪中的应用与特性分析
发布时间:2025-07-09     作者:kx   分享到:
文献综述:具备PD-1膜球蛋白的重构混后肿瘤细胞外囊泡用在胞质物品搬家超链接://www.mdpi.com/2072-6694/14/11/2635我们:石川拉贺†奥西德,吉田章介‡,泽田新一,佐佐木义弘和秋吉一成*节选:的原材料杆状新冠病毒表述装置最常用的秋粘虫Spodoptera frugiperda的Sf9动物神经肿瘤细胞系购自Invitrogen总部(韩国加利福尼亚州沃尔瑟姆)。HeLa神经肿瘤细胞购自JCRB Bank(欧美钻研动物资源共享收藏重心,欧美大阪)。 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DOPC)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸- L -丝氨酸 (DOPS)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸酒精胺- N -(菁 5) (Cy5-DOPE)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸酒精胺- N -(7-硝基-2-1,3-苯并恶二唑-4-基) (NBD-DOPE) 和 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸酒精胺- N -(丽丝胺罗丹明 B 磺酰基) (Rho-DOPE) 均购自 Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL, USA)。脂质体系备将DOPC、DOPS、NBD-DOPE、Rho-DOPE和Cy5-DOPE以不同于的摩尔比在玻璃钢微管上的氯仿中混。在传递的氩气下汽化萃取剂,演变成脂质膜。将膜居于机械泵干澡器中隔夜,以压根去掉氯仿。注入250 µL抗震液(20 mM CH3COOH/CH3COONa(pH 4.5)或10 mM Tris-HCl(pH 7.5))使膜水合,并在27 °C下孵育隔夜。选择微形熔融造粒机(Avanti Polar Lipids)将浮悬液熔融抽出100 nm外径的pc聚碳酸酯膜。选择磷脂C各种测试(Wako,澳大利亚大阪)測量脂质渗透压。简而言的之,磷脂酶D和胆碱腐蚀想法想法酶从磷脂仿品中有过腐蚀想法想法氢。有的过腐蚀想法想法氢在过腐蚀想法想法物酶的效果下推动N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(DAOS)与4-氨基安替比林情况缩合想法,转换成绿色颜料,使用检测法该颜料的吸光度,然而检测法仿品中的磷脂渗透压。

Cy5-DOPE

成相普鲁士蓝染色血细胞术PD-1 EVs 用 5- 或 6-( N-蜜腊酰亚胺氧羰基)荧光素 3′,6′-二乙酸酯 (CFSE)脱色。将 CFSE 增长到 PD-1 EVs 悬浮物液中,使其终有机废气浓度为 62.8 µM,第二步在 37 °C 下孵育 30 一分钟的时间。方便清掉存在的 CFSE,在安全安全使用 100,000 NMWL Amicon 超离心力滤出器(Merck Millipore,荷兰马萨诸塞州伯灵顿)洗涤标记图片的 PD-1 EVs。以 100:100:1 的 DOPC、DOPS 和 Cy5-DOPE 摩尔比制法脂质体。将 CFSE PD-1 EVs(5 µg/mL)和 Cy5 脂质体(1 µM)在弱酸性或碱式盐状况下搭配,并在 27 °C 下孵育 30 一分钟的时间。依据申请加入与想法硫酸铜溶液等球体积的pH 7.5减慢液撤消相融想法。PD-1杂合胞休外膜依据100nm直径的膜一挤。在安全安全使用ImageStream x MkII(Merck Millipore)爬取PD-1杂合胞休外膜的多光谱数据分析图象。激光机器耗油率系统配置为*大值(488nm:200mW;642nm:150mW;785nm(侧向散射):70mW)。荧光信号灯在通路2(CFSE)或通路5(Cy5)中获取。通路1和通路6分为系统配置为明场和侧向散射。在40倍调大数倍下爬取10,000个离子的荧光抗弯强度,并在安全安全使用IDEAS 6.2系统确定数据分析。宝鸡pg电子娱乐游戏app 海洋生物提供了相关内容类产品:cRGD(c[RGDfK])-PEG-DSPEcRGD-PEG-SHRVG29-PEG-DSPEVIP-PEG-DSPEm-PEG8-DSPEDSPE-Fluorescein/DSPE-FITCDSPE-PEG-CHEMS以上项目好文章项目种类各期刊杂志或期刊论文,假如有侵犯商标权请链接我国删了!