Cy5-DOPE在细胞膜荧光示踪中的应用与特性分析
学术论文:具备着PD-1膜蛋清的协同混合法内部外囊泡代替胞质物料物流运输的链接://www.mdpi.com/2072-6694/14/11/2635小说家:石川拉贺†奥西德,吉田章介‡,泽田新一,佐佐木义弘和秋吉一成*节选:的材料杆状病毒有哪些传达装置经常用的秋粘虫Spodoptera frugiperda的Sf9虫类血细胞系系购自Invitrogen集团(美式加利福尼亚州沃尔瑟姆)。HeLa血细胞系购自JCRB Bank(法国分析微生物影视资源储藏管理中心,法国大阪)。 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱 (DOPC)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸- L -丝氨酸 (DOPS)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺- N -(菁 5) (Cy5-DOPE)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺- N -(7-硝基-2-1,3-苯并恶二唑-4-基) (NBD-DOPE) 和 1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺- N -(丽丝胺罗丹明 B 磺酰基) (Rho-DOPE) 均购自 Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL, USA)。脂质构成备将DOPC、DOPS、NBD-DOPE、Rho-DOPE和Cy5-DOPE以差异的摩尔比在玻璃纸微管上的氯仿中混杂。在游动的氩气下减压蒸馏相转移催化剂,演变成脂质膜。将膜置入真空泵潮湿器中包夜,以非常避开氯仿。建立250 µL加载液(20 mM CH3COOH/CH3COONa(pH 4.5)或10 mM Tris-HCl(pH 7.5))使膜水合,并在27 °C下孵育包夜。用的小型空气开关挤压机(Avanti Polar Lipids)将透明桌面液挤压100 nm直径的聚碳酸膜。用的磷脂C测评(Wako,印度大阪)測量脂质盐氧化还原电位。简衡量之,磷脂酶D和胆碱氧化的反应的的的酶从磷脂合格品中诞生过氧化的反应的的的氢。诞生的过氧化的反应的的的氢在过氧化的反应的的的物酶的功用下推动N-乙基-N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(DAOS)与4-氨基安替比林进行缩合的反应,导出天蓝色染色剂,使用检测该染色剂的吸光度,可以检测合格品中的磷脂盐氧化还原电位。



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