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DOPE-PEG-Biotin在巨型单层囊泡膜构建中的应用研究
发布时间:2025-07-08     作者:kx   分享到:
学术论文:脂质膜上的水分子装配途经外部链接://www.cell.com/biophysj/fulltext/S0006-3495(17)30844-5作著:卡斯帕· 范德韦尔1∙多丽丝 ·海因里希1,2∙丹妮拉·J· 克拉多夫特1节选:耐腐蚀品苯氯乙烯 (99%)、衣康酸 (99%)、4,4'-偶氮双 (4-氰基戊酸) (98%)、D-夏黑葡萄糖水 (99%)、牛血纯洁核球蛋白 (98%)、甲醇 (99.9%)、氯仿 (99%)、磷酸钠 (99%)、硫化氘 (70%)、N-羟基磺化蜜腊酰亚胺钠盐 (98%) 和 1,3,5,7-四甲基-8-苯基-4,4-二氟硼氮杂引达省苯 (97%, BODIPY) 购自 Sigma-Aldrich, St. Louis, MO;甲氧基聚(乙二醇)胺 (mPEG, M W  = 5000) 购自 Alfa Aesar;氯化钠 (99%) 和叠氮化钠 (99%) 购自 Acros Organics; 1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳二亚胺稀盐酸盐 (99%),原于 Carl Roth;NeutrAvidin (*生物制品制品技术学素核球蛋白) 和霍乱毒物 B 亚基 Alexa Fluor 488 通过物 (霍乱毒物 488),原于 Thermo Scientific;DNA 寡核苷酸 (生物制品制品技术学素-5′-TTTAATATTA-3′-Cy3),原于 Integrated DNA Technologies;或原于Avanti Polar Lipids集团的Δ9-顺式1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(DOPC)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸无水无水乙醇胺-N-(生物制品制品技术学素基(聚乙二醇)-2000) (DOPE-PEG-生物制品制品技术学素)、1,2-二油酰-sn-甘油-3-磷酸无水无水乙醇胺-N-(丽丝胺罗丹明B磺酰基) (DOPE-罗丹明)和G M1精神节苷脂(GM1)。整个无机化学原料均按原样施用。整个研究均施用用于Millipore过滤清洁装置(Milli-Q Gradient A10)刷快的电容率是18.2 M Ω cm的去铝离子水。膜提纯选择条件电热澎涨技木制法厚度为 5 至 20  μm的超大型双层囊泡 (GUV) ( 14 )。在氯仿中制法 2 g/L 的脂质混合垃圾法物,其由 97.5 wt.% DOPC、2.0 wt.% DOPE-PEG-生物制品素和 0.5 wt.% DOPE-罗丹明构成的。反驳来,取 10 μL该饱和盐悬浊液在二块 6 cm2 的氧化的铟锡纳米涂层载玻片上(15–25𝛺,Sigma-Aldrich),并且浸入在具有刺激性100 mM 巨峰葡糖和0.3 mM 叠氮化钠的49:51 D2O:H2O饱和盐悬浊液中。从而引诱囊泡出现,将电*至于10 Hz 下1.1 V (rms) 额定电压下一直2每小时。将从此获得了的囊泡吸收在室内温度牛血清廉蛋白质包被的小瓶中。从而可抑制较小囊泡的人数,大家在实用前马上实用Whatmann 5.0 μm口径硝酸铵纤维材料素滤过器滤过GUV 饱和盐悬浊液( 15 )。而言膜管化试验,实用神经末梢节苷脂GM1和纺织染料霍乱毒性488一般膜小叶开始印染的,如下如下如下:将作出氯仿中的脂质混合垃圾法物转让到甲醇中,插入0.2 wt.% GM1。并且按作出方式开始电热澎涨。图纸制法的时候,将 50 mg/L 霍乱毒性 488 插入到聚磷酸盐缓存数据盐饱和盐悬浊液 (PBS) 中,仅对囊泡的表面层开始印染的。

DOPE-PEG-Biotin

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