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DSPE-PEG-Cy7标记胶束的合成与纯化流程
发布时间:2025-07-01     作者:kx   分享到:
学术论文:规格尺寸、电势和肽配体粗度对小有机的奈米水粒子肾脏靶向疗法性的影向联接://aiche.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/btm2.10173小说家:黄毅, 蒋凯瑞, 张旭亭, 殷志忠节选:胶束合并实施标准化Fmoc介导的固相肽自动化提炼法,在全自动化操作化PS3肽自动化提炼仪(意大利亚利桑那州图森市Protein Technologies有限集团公司)上,动用rink Amide光敏树脂材料(意大利亚利桑那州图森市Protein Technologies有限集团公司)自动化提炼肽。全部的肽队列的N未端均调用半胱氨酸,以实施硫醚键合体现。再用体积太之比94:2.5:2.5:1的三氟乙酸:1,2-乙二硫醇:水:三异丙基硅烷将肽从光敏树脂材料上切去。切去的肽用寒冷的乙醚水解并洗滌四次,不溶Milli-Q纯硫酸铜溶液,冻干后保管于-20°C。粗肽在反相高效性色谱仪色谱法(HPLC)(Shimadzu,京都,日本的)在 C18 柱(Phenomenex,Torrance,CA)上在 55°C 下使用 0.1% 甲酸的乙腈/水混物实施纯化。适用栽培基质辅助的缴光解吸电离飞机飞行周期质谱浅析 (MALDI-TOF) (Autoflex speed, Bruker, Billerica, MA) 对纯化的肽参与研究方法,并顺利通过硫醚键与 1,2 二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸工业乙醇胺 N-[马来酰亚胺 (聚乙二醇)-1000/2000/5000] 或 DSPE-PEG (1000)-马来酰亚胺/DSPE-PEG (2000)-马来酰亚胺/DSPE-PEG (5000)-马来酰亚胺 (Avanti Polar Lipids, Alabaster, AL) 紧密联系,将等摩尔量的脂质和纯肽在 Milli-Q 水 (pH 7.2) 中混合型,环境温度下猛地打料已超 24 小的时候。搭配物经C4柱(Phenomenex总部,加州托伦斯)进几步纯化,连用如上所讲的MALDI-TOF参与表现。荧光团偶联聚己内酯的制成如下所示:将等摩尔量的Cyanine7 NHS酯(Lumiprobe总部,马里银川亨特谷)与1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸甲醇胺N-[氨基(聚乙二醇)-1000/2000/5000](铵盐)或DSPE-PEG(1000)-胺/DSPE-PEG(2000)-胺/DSPE-PEG(5000)-胺(Avanti Polar Lipids总部,阿拉巴马州阿拉巴斯特)在0.1 M碳酸氢钠氢氧化钠溶液(pH 8.3)中搭配,温度過夜。搭配物经C4柱纯化,连用如上所讲的MALDI-TOF参与表现。经过自组装流水线炼制了13用途型的胶束。炼制了由不一摩尔比的两亲分子式组成的的胶束:100% DSPE-PEG-肽、50:50摩尔比的DSPE-PEG-甲氧基:DSPE-PEG-肽、90:10摩尔比的DSPE-PEG-肽:DSPE-PEG-Cy7并且45:45:10摩尔比的DSPE-PEG-甲氧基:DSPE-PEG-肽:DSPE-PEG-Cy7。将其他模型融化于甲醇或氯仿中,还用氢气烘干产生溥膜。溥膜在真空体下常温、干燥包夜,并在80°C排水化301分钟。中用 DLS、zeta 电位差测试和 TEM 的胶束在 Milli-Q 水污水化,而中用休内给药的胶束在聚磷酸盐响应氢氧化钠溶液 (PBS) 污水化。

DSPE-PEG-Cy7

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