DSPE-PEG-VS 介导的抗体定向偶联策略
DSPE-PEG-VS 介导的免疫抗体方向偶联政策链接代码://www.cell.com/molecular-therapy-family/molecular-therapy/fulltext/S1525-0016(05)00162-0小说家:安妮特 ·威尔逊,亨特,肖恩· 阿尔伯,唐志,史蒂文· 肯内尔,西蒙· 沃特金斯,叶 黄,布鲁斯· 皮特,宋丽 论文摘要:肺内皮在维护正常值肺里生理学基本能力表这方面发挥出来重点要角色,其基本能力表性性障碍与种肺里常见急病有观。借助反义寡脱氧核苷酸 (ODN) 改正内皮基本能力表性性障碍依赖性于发展设计有有一种就能能够率地将 ODN 递送回肺内皮且致毒*小的递送媒体。在此,你们发展设计了有有一种多作用脂质媒体,就能能够率地将 ODN 靶向治疗递送回肺内皮。该的具体方案依据有有一种借助可正铝离子化的氨基脂质(1,2-二油酰-3-二甲基丙烷铵)和含乙酸乙酯的缓冲器网络体系将大批量多聚阴正铝离子 ODN 快递在脂质囊泡中的的具体方案。内皮特男人*体 (273-34A) 借助二硬脂酰磷脂酰乙酸乙酯胺-聚乙二醇每隔物被兼容合并到脂质囊泡中。 273-34A*体在离体和身体内部均能能够介导ODN递送回小鼠肺内皮神经元。前者,该药物制剂的一身上下给药兼有*低的血样循环系统学致毒,且基本上不想出现一身上下和肺里血样循环系统和流体动力学性的亚急性转变 。这部分毕竟为脂质介导的ODN递送广泛用于*肺里常见急病确定了条件。前者,该的具体方案还用做为表现肺内皮神经元染色体基本能力表的理论研究平台。建材和方式方法脂质和化学物品物品EPC、1,2-二酰基-sn-甘油-3-磷酸乙酸乙酯胺-N- [甲氧基(聚乙二醇)2000]、1,2-二硬脂酰基-sn-甘油-3-磷酸乙酸乙酯胺 (DSPE) 和 DODAP 购自 Avanti Polar Lipids, Inc.(荷兰阿拉巴马州阿拉巴斯特)。CH、3-(2-吡啶二硫代)丙酸N-羟基蜜腊酰亚胺酯 (SPDP)、二硫苏糖醇 (DTT)、大鼠 IgG 和病菌(直肠杆菌)LPS 购自 Sigma-Aldrich(荷兰密苏里州圣路易斯)。α-氯乙烯基砜、聚乙二醇-丙酸的 ω- N-羟基蜜腊酰亚胺酯 MW 3400 (NHS-PEG-VS) 购自 Shearwater Polymers(荷兰阿拉巴马州亨茨维尔)。 DSPE-PEG-VS(MW 2507)是以前面的办法合出[39]。*体的使用大鼠*鼠TM (273-34A) 用作炎症因子聊天配体,其准备方式 参与[30]。以正常值大鼠IgG用作比对配体。大鼠*鼠ICAM-1单克隆*体YN1/1购自eBioscience司(俄罗斯加利福尼亚州旅游圣地亚哥)。Alexa Fluor-488小尾寒羊*鼠IgG购自Molecular Probes司(俄罗斯俄勒冈州尤金)。寡核苷酸几乎所有ODN均以硫代磷酸酯骨架自动合成图片,但使用在核酸酶理论研究分析的ODN不在其内,该ODN以PO骨架自动合成图片(美国的德克萨斯州米德兰市米德兰企业认证化学试剂司)。使用在摄食和地域分布理论研究的ODN由Cy3记号的ODN与未记号的ODN包含,基数为1:4(w/w)。含ODN的脂质囊泡的制取以Semple抓捕 [20]说明的工艺制取含ODN的脂质囊泡。简一般来说之,在100%甲醇中制取由EPC:CH:DODAP [25:52:20 (m/m)]組成的脂质悬浊液。成了制取*体靶向药物脂质囊泡,将3 mol%的DSPE-PEG-VS具有刺激性到脂质中。在独自的试分液漏斗,用300 mM柠檬汁汁酸(pH 4.0)制取ODN。点火悬浊液,之后将脂质悬浊液比较慢具有刺激性到ODN中,必定会甲醇的*终有机废气浓度为40% (v/v)。ODN:脂质的输进比值0.15 (w/w)。将融合物根据100 nmpc聚碳酸酯滤膜。将中药制剂对pH 4.0的柠檬汁汁酸盐缓解液完成透析,相结第一步对pH 7.6的Hepes缓解液完成透析。*后根据疑胶过滤装置将具有刺激性ODN的脂质囊泡与自由ODN分离处理,并按专著[9]的工艺校正囊泡的大大小小和ζ电位差。*体(Ab)硫醇化并与脂质囊泡偶联利用与SPDP反馈制法硫醇化*体。但是用DTT操作完美重现*体上的PDP基团。将有DSPE-PEG-VS的脂质囊泡与硫醇化*体在22°C下孵育2小时左右,但是在4°C下孵育包夜,并悄悄地混和。利用妇科凝胶过滤装置弄掉未搭配的*体。