PKH26荧光染料的化学结构与性质以及染色方法

1. 化学结构与性质

PKH26有的是种桔橙红色荧光纺织染料，无机分子结构式为C₅₉H₉₇IN₂，分子结构量为961.34。它也可以稳定性高地结合起来到组织细胞核系结构质的脂质区域环境，发出了自然的桔橙红色荧光，其增进光的光谱为551nm，发射点光的光谱为567nm。PKH26存在高脂无水磷酸氢，也可以轻松吸收组织细胞核系结构质，对组织细胞核系结构致癌性较小，荧光底色低，且没有应响组织细胞核系结构的日常生理学的功能。 

2. 应用领域

- 受损細胞标识与示踪：PKH26多方面于身体之外和胃中的受损細胞标识与示踪深入分析。它是可以与受损細胞膜固定搭配，进行长久的荧光标识，会让标识的受损細胞在植物的生长时间段内都能保证荧光讯号。举列，在受损細胞移迁和侵蚀性深入分析中，PKH26可于标识恶性肿瘤受损細胞，经由受损細胞裂痕研究或Transwell研究评价指标其移迁和侵蚀性特性。- 血神经元核繁殖分析：PKH26常用于检则血神经元核繁殖。在血神经元核分列操作过程中，荧光抗弯比强度会伴随血神经元核的分列而逐步下降，标上荧光可最低值都分配好至二个子代血神经元核中。凭借流式的血神经元核仪，会结合荧光抗弯比强度的有所不同检则出未分列血神经元核、分列每次、六次、六次及比较多分列多次的血神经元核。- 外泌体标出：PKH26还也可以用在于标出外泌体。外泌体是内部膜分泌物的细小囊泡，进行内部膜间通信设备和发病造成壮大。根据PKH26标出外泌体，也可以研究方案其在内部膜间的传输和作用。- 某个应运：PKH26还都可以于研究探讨安排腐化影响、安排间膜的转意、抗原呈递、安排黏附性与安排切成片中的运动神经元转移。 

3. 染色方法

- 存量液制作：将1mg PKH26溶解完在1mL DMSO中，有1mM存量液。存量液意见建议在-20°C或-80°C背光另存，禁止间断性冻融。- 事情液自制：用无血清生殖细胞锻炼基或PBS按1:50或1:100希释产出液，能够 5-10μM的事情液。- 上皮癌血组织受损细胞膜复染：相对浮窗上皮癌血组织受损细胞膜，将上皮癌血组织受损细胞膜强度整改为1×10⁶/mL，添加1mL岗位液，室内温度孵育10-4两7分钟的英文，并且用PBS洗滌。相对贴壁上皮癌血组织受损细胞膜，将上皮癌血组织受损细胞膜培育在盖玻片上，添加100μL岗位液，轻摇盖住上皮癌血组织受损细胞膜，室内温度孵育5-307分钟的英文，再换培育基洗滌。 

4. 优点

- 高保持稳界定：PKH26的荧光卫星信号光亮且保持增强，即便在经常间隔观察分析和科学试验中就不由于荧光衰减而引响上皮细胞关注实际效果。- 不损害神经内部功用键：标示后的神经内部如果保护一切正常的生物工程学特异性和功用键，不能扰乱神经内部實驗的結果。- 高迟钝度和特喜欢的人：PKH26都可以在很低的渗透压下记号细胞膜，兼备高迟钝度和特喜欢的人。- 男人持久的荧光表现：PKH26活性染料能够与神经元膜安全稳定运用，符号神经元在的生长寿命内都能始终保持荧光表现，不同下次上色。 

5. 注意事项

- PKH26化学药品为DMSO溶剂，在环境温度都会初凝，应该蒸汽加热融掉后选择。- 上色作业液必须 现配使用，没能晚到配置，以以免 纺织染料溶解和变质。- 活性染料全过程中都要管控酌情的孵育时间间隔和水温，以以保证活性染料与体细胞质的融合使用效果。- 洗衣机清洗步骤之一应优化调整，以为了确保既的还原多余的东西纺织染料又不严重破坏生殖细胞的成分和特点。 PKH26成为一个高效化的受损生殖细胞标签颜料，而致高不稳确定性、低毒副作用并且坚持下去的荧光4g信号，在受损生殖细胞怪物学、临床科研并且用量递送等邻域具有着广泛性的采用发展趋势。

 

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