DSPE-PEG-NH2 与 COOH 的偶联发应必要条件详细分析

DSPE-PEG-NH2（氨基体现的聚乙二醇磷脂）一种广采用于脂质体体现、生物工程材质从表面作用化、靶点递送系统的中的两亲性原子核。它由亲水的 PEG 链和亲脂的 DSPE（1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸无水乙醇胺）组建，PEG 端部绘制有氨基（–NH2）。此种氨基需要与极具羧基（–COOH）效果团的分子空间结构造成酰胺键偶联生理反应，确保空间结构专向的共价突显。

一、影响基本原理详述

DSPE-PEG-NH2 与 COOH 的共价偶联想法都属于酰胺键的建成想法，一元论上是羧酸与胺基在一定的先决条件下缩合提取酰胺。该想法在动物资料和治疗药物递送风险管理体系中用广泛的，主要涵盖不同常见到偶联方法：

EDC/NHS 活化法

CDI（碳二亚胺）法

二、惯用响应管理体制与生活条件

1. EDC/NHS 活性法（比较常见）

作用物：

DSPE-PEG-NH2（混溶 DMSO、DMF 或水）

羧基化氧分子式（如小氧分子式、球蛋白、缔合物等）

EDC：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺

NHS：N-羟基琥珀酰亚胺

生理反应操作步骤：

将带有 –COOH 的分子溶于 MES 缓冲液（pH 5.0~6.0）或无水有机溶剂（如 DMF/DMSO）中；

加入 EDC 与 NHS（摩尔比推荐 EDC:NHS:COOH = 2:2:1）激活羧基；

室温反应 15~30 分钟，生成中间活性酯（NHS-酯）；

成为 DSPE-PEG-NH2，在 pH 7.4 前提条件下反响 4~12 一小时；

透析、冻干或层析纯化结果。

现象区域环境：

pH 6.0 激活，pH 7.2~7.5 偶联；

温度建议 20~25°C，避免高温降解。

高沸点溶剂：

有机体系：DMSO 或 DMF；

水溶体系：MES 或 PBS 缓冲液，需兼顾两者溶解性。

关注事由：

DSPE-PEG-NH2 先要在有机物相溶水，再逐加入适量入活性液；

闭光作用，必免一些敏锐分子式分解；

若目的氧分子为食物活性酶酶化学物质，应以免生物碳相转移催化剂对其活性酶酶诱发干扰。

2. CDI 法（碳二亚胺活性羧酸）

原理：羧酸首先被 CDI 活化形成酰基咪唑中间体，随后与胺基缩合生成酰胺键。

优点：不需 NHS、无副产物、反应温和；

毛病：对水强烈，平常在无水场景下做出。

步奏：

将羧基化分子溶于无水 DCM、THF 或 DMF；

加入 CDI（1.1~2 等摩尔），室温反应 1 小时；

加如 DSPE-PEG-NH2；

室温或略加热（25–40°C）反应 6~12 小时；

纯化方式与 EDC/NHS 法相似。

三、干扰不良反应工作效率的原因

反应 pH：

羧基产甲烷过程需用微偏酸；

胺基偶联阶段需要中性偏碱（pH 7.4~8.0）；

摩尔比：

为确保偶联效率，一般羧基与胺基摩尔比使用 1.2:1 或更高；

容剂确定：

水相非常适合亲水小分子结构；

有机质相合适疏水性聚氨酯羧基低物。

PEG 链长：

PEG2000 或 PEG3400 是常用规格，链长对水溶性和空间位阻有影响。

四、app例子

DSPE-PEG-NH2 与通透质酸（HA-COOH）偶联分离纯化 HA-PEG-DSPE，广泛用于靶向治疗癌症脂质体；

与小分子如叶酸、肽类的 COOH 偶联，用于制备靶向修饰纳米药物；

与壳聚糖衍生品物偶联，广泛用于备制阳铝离子脂质体或染色体质粒。

五、归纳总结

DSPE-PEG-NH2 与 COOH 的反应是勾勒基本功能脂质体、生物技术相融性nm用料的为重要过程。以 EDC/NHS 或 CDI 为使用偶联手段，该不起作用在温润因素下使用，能高效化形成了不稳的酰胺键。借助政策调控不起作用因素（如 pH、石油醚、发生反应日期等）可改善成品率和阶段目标形式的补齐，宽泛用到口服药递送、显像电极、狂犬疫苗递送等先进的动物药学的领域。