磁珠法是种固相各种载体可逆反应化放置(SPRI)的分离出来纯化方式 ,大部分原理图为:在不同的渗透压的PEG(polyethylene glycol;聚乙二醇)中,能有区别场面描写尺寸的DNA离心分离在磁珠的羧基淡化层上,这部分DNA可以再溶于在硫酸铜溶液,仅以来冲洗掉收售。
实验英文在使用的磁珠可分为四层(图1;网套直径1μm),由内以外由大到为:聚苯氯乙稀装修素材的主导、超顺磁装修素材(具体为四空气氧化三铁)、**层聚苯氯乙稀装修素材、**层超顺磁装修素材和的的表面滑的羧基掩盖层。滑的的的表面更善于核酸与羧基掩盖层结合起来。
图1.磁珠各层化学成分
在一部分组织体制中,PEG的含量是导致DNA二手回收的判断性环境各种因素(许多环境各种因素还包涵DNA大小不一和酸度、盐正离子酸度、用处日子等等等等)。DNA在千万氧化还原电位的PEG留存环境下,NaCl或MgCl2加快下,使DNA出现脱水处理症状,大分子构象会出现快速变动,由线状被压缩视频成型蜷曲球状,进而汇聚沉淀自己,同一随PEG团伙量、溶液密度各种盐溶液密度的差异,差异长短的DNA行被选择性的沉淀自己出现。在磁珠安全体系中,特殊原子核量(较为常用的是PEG8000)的PEG的工作主要是是与盐亚铁离子共同体效应,增加区别高度DNA的碳原子构象,同一时间曾加体系建设的胶状层面,使磁珠在里面所处飘浮程序,不适合沉降,曾加磁珠在空間地址的磕碰与歧视,以此曾加核酸与磁珠的集中的效率与效率,除此本身,PEG与球膳食纤维兼备混溶性,也可避开样机中的球膳食纤维。
图2. 磁珠与DNA构建提醒图
某个主打看法认同,仍处于PEG和盐阴阳离子环保中的DNA,因脱水怎么办功效而造成原子构象改变了后,会泄漏着磷酸骨墙上巨大的带负带电粒子量的磷酸基团,与接触面带负带电粒子量的羧基磁珠融入。负负带电粒子量期间的功效是会因为带正带电粒子量的盐亚铁离子的功效(如Na+;图2)。带负电的磷酸基团借由解离的盐阳离子(如Na+)与羧基形成了化合物桥,使DNA被活性聊天降解到羧基磁珠接触面。当PEG和酸盐被删去在此之后,填加水性聚氨酯碳原子,会快捷加以水化DNA,撤销其两者上下级间的化合物上下级功能,使树脂吸附到磁珠的DNA被纯化而来。
运行的准确步数详细图3(0.6x表达DNA氢氧化钠溶液大小的0.6倍;该倍率要依照与其差异的实践体系建设自愿测试调控):
图3.磁珠法区分400-600bp DNA片断的流程
若是只不过是分離纯化单条带PCR结果,我门一般说来选用1.2x的磁珠,与PCR乙酰乙酸在EP管道内部搭配后加在磁力链接架子上1多分钟,放弃上清,70%工业酒精洗條1次后温度皮肤干燥,并且将EP管从种子链接墙上拿下,TE某些注射用水与磁珠混和,并且放回磁性架取上清,整工作用时约15分种。
磁珠DNA分开法中2次选择了ed2k架,来使磁珠聚合在一起快捷出掉过柱液。通常情况德国ed2k架(针对性EP管也许96孔PCR板)约1000-5000市民币,当时的我们探索室(中国国家大海本科大学大海生物技术层次性性与升级探索所-繁衍人类基因组学调查室)够确认3D印刷机自动印刷并在使用了希土相关材料设计拍摄的锻造开关磁阻电机铁,特效有的好于商业楼化软件。特定设计拍摄方法步骤公司会在后来的更新中介商绍。
硅基磁珠 | 固相萃取磁珠 |
PuriMag Si-benzylchloride 苄基氯修饰磁珠 | |
PuriMag Si-benzol 苯基修饰磁珠 | |
PuriMag Si-Cyclohexane 环己基修饰磁珠 | |
PuriMag Si-C18 十八烷基修饰磁珠|Dynabeads® RPC 18等效磁珠|C18磁珠 | |
PuriMag Si-C12 十二烷基修饰磁珠|Dynabeads® RPC 18等效磁珠|疏水磁珠 | |
PuriMag Si-C8 辛基修饰磁珠|疏水磁珠|Dynabeads® RPC protein等效疏水磁珠 | |
PuriMag Si-Cl氯丙基修饰磁珠 | |
PuriMag Si-C3 丙基修饰磁珠|Dynabeads® RPC protein等效疏水磁珠 | |
偶联用磁珠 | |
PuriMag Si-DEAE 单核硅质DEAE弱阴离子交换磁珠 | |
PuriMag Si-SH 巯基修饰磁珠 | |
PuriMag Si-Epoxy 环氧基修饰磁珠|环氧基磁珠|硅包覆环氧基磁珠 | |
PuriMag Si-COOH 羧基修饰磁珠|羧基磁珠|硅羧基磁珠 | |
氨基磁珠|硅包覆氨基磁珠|PuriMag Si-NH2 氨基修饰磁珠|amine magnetic bead | |
核酸提取磁珠 | |
核酸DNA/RNA提取纯化磁珠 氨基修饰 | |
核酸DNA/RNA纯化提取磁珠 羧基修饰 | |
DNA提取硅羟基磁珠|RNA提取磁珠|核酸提取磁珠 | |
GMA磁珠 | 亲和素磁珠|亲和素标记磁珠|avidin magnetic bead |
巯基磁珠PuriMag G-SH | |
NHS磁珠|高载量PuriMag G-NHS磁珠 | |
叠氮磁珠|Azide 磁珠|炔烃标记蛋白点击偶联|PuriMag G-Azide Beads|Azide magnetic bead | |
蛋白L磁珠|Protein L磁珠|Protein L magnetic bead|抗体纯化|免疫沉淀 | |
蛋白A/G磁珠|Protein A/G磁珠|Protein A/G magnetic bead | |
蛋白G磁珠|ProteinG磁珠|Protein G magnetic bead | |
蛋白A磁珠|Protein A磁珠|Protein A magnetic bead|免疫沉淀|抗体纯化 | |
生物素磁珠|生物素修饰磁珠|biotin磁珠|biotin magnetic bead|PuriMag™ G-Biotin | |
甲苯磺酰基活化磁珠|PuriMag G-Ts聚合物磁珠 | |
氨基磁珠|高密度氨基磁珠|聚合物磁性微球|PuriMag G-NH2|amine magnetic bead | |
羧基磁珠|羧基修饰磁珠|高密度羧基磁珠|聚合物羧基磁珠PuriMag G-COOH|carboxyl magnetic bead | |
羟基磁珠聚合物包覆磁珠PuriMag GS-OH(短臂) | |
环氧基磁珠|聚合物包覆磁珠PuriMag G-Epoxy|高环氧基密度磁珠| | |
链霉亲和素磁珠|SA磁珠|亲和素磁珠|PuriMag G-streptavidin 高biotin结合容量 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—阳离子交换 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—阴离子交换 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面氯甲基 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面环氧基|环氧基磁珠|高密度环氧基磁珠 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠 | |
聚苯乙烯(PS)包覆磁珠—表面羧基|羧基磁珠|高密度羧基 | |
聚苯乙烯磁性微球 | 羧基磁珠|化学发光磁珠|发光免疫磁珠 |
链霉亲和素磁珠|1微米 SA 磁珠|免疫发光磁珠|链霉亲和素标记磁珠 | |
超均一单分散磁珠表面二氧化硅包覆PuriMag-Homo-SiO2 | |
超均一单分散磁珠表面聚合包覆PuriMag-Homo-polymer | |
琼脂糖磁性微球 | 偶联用琼脂糖磁珠 |
羧基活化琼脂糖磁珠|羧基琼脂糖微球|Magarose-COOH | |
氨基活化琼脂糖磁珠|氨基琼脂糖微球|Magarose-NH2 | |
NHS活化琼脂糖磁珠|NHS琼脂糖微球|Magarose-NHS | |
环氧基活化琼脂糖磁珠|环氧基琼脂糖微球|Magarose-Epoxy | |
CNBr活化琼脂糖磁珠|CNBr琼脂糖微球|Magarose-CNBr | |
醛基活化琼脂糖磁珠|醛基琼脂糖微球|Magarose-CHO | |
琼脂糖磁性微球|琼脂糖磁珠|Magnetic agarose bead | |
蛋白纯化琼脂糖磁珠 | |
Protein A/G包被琼脂糖磁珠|Protein A/G包被琼脂糖微球|Magarose-ProA/G | |
Strep-tag II蛋白纯化磁珠|Strep-Tactin琼脂糖磁性微球 | |
DEAE弱阴离子交换琼脂糖磁珠 | |
肝素包被琼脂糖磁珠|Heparin包被琼脂糖微球 | |
GST融合蛋白纯化用琼脂糖磁珠 | |
His-tag标签蛋白纯化磁珠Magarose TED | |
组氨酸标签蛋白纯化磁珠|Magarose NTA | |
His标签蛋白纯化磁珠|Magarose IDA | |
其他 | 羧基磁珠|羧基磁性微球|羧基磁性纳米粒子 |
Fe3O4磁核|超顺磁性纳米氧化铁|铁氧体磁珠|200-400nm磁性纳米粒子 | |
PCR产物纯化磁珠|Agencourt AMPure XP等效磁珠 | |
免疫磁珠 | 链霉亲和素磁珠 |
链霉亲和素-生物素(SA-Biotin) | |
Streptavidin/SA/链霉亲和素 | |
蛋白偶联链霉亲和素共价连接于固相载体表面 | |
结合生物素化抗 体、核酸、蛋白等配体分子 | |
免疫沉淀磁珠Protein A/G | |
Mag NH修饰生物配体快速偶联磁珠 | |
Magrose NHS修饰生物配体快速偶联磁珠 | |
基础磁珠 | 羟基磁珠Mag OH/核酸提取和纯化设计 |
羧基磁珠Mag COOH | |
超顺磁性、快速磁响应性、丰富羧基官能团、单分散性和亚微米尺度粒径 | |
蛋白分离纯化羧基磁珠 | |
羧基磁珠高载量蛋白/多肽/寡聚核苷酸/**分子 | |
氨基磁珠Mag NH2 | |
单分散性氨基磁珠 | |
寡聚核苷/蛋白/多肽-戊二醛-共价偶联微球表面 | |
葡聚糖纳米磁珠Dextran | |
超顺磁性氧化铁颗粒粒径为13-15 nm之间 | |
蛋白纯化磁珠 | His-tag蛋白纯化磁珠 |
IDA-Nickel | |
IDA-Cobalt | |
IDA-Nickel Kit | |
IDA-Cobalt Kit | |
GST融合蛋白纯化磁珠 | |
融合蛋白纯化磁珠GSH | |
融合蛋白纯化磁珠GSH kit | |
Strep-tag II蛋白纯化磁珠 | |
新型功能化材料Strep-tag II | |
新型功能化材料蛋白纯化磁珠 | |
Magrose Strep-Tactin | |
Magrose Strep-Tactin kit | |
rp-Ser-His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys | |
肝素磁珠 | |
Magrose Heparin | |
快速的磁响应性的肝素磁珠 | |
磁珠表面偶联肝素带有负电性硫酸根离子基团 | |
DEAE磁珠 | |
Magrose DEAE弱阴离子交换磁珠 | |
快速的磁响应性DEAE磁珠 | |
离子交换能力的DEAE磁珠 | |
**的蛋白结合能力的DEAE磁珠 | |
离子交换配基为二乙氨乙基的DEAE磁珠 | |
抗体纯化磁珠 | |
Protein A/G抗体纯化磁珠 | |
Protein A Antibody Purification Kit | |
Protein A/G Antibody Purification Kit | |
Magrose ProteinA Antibody Purification | |
核酸提取磁珠 | 病毒DNA/RNA提取试剂盒Viral DNA/RNA Kit |
游离DNA提取试剂盒Circulating DNA Ki | |
唾液基因组DNA提取试剂盒Saliva DNA Kit | |
粪便总DNA提取试剂盒Stool DNA Kit | |
血液基因组DNA提取磁珠试剂盒Blood DNA Extraction Kit | |
DNA片段筛选试剂盒(磁珠法)DNA Select Isolation | |
PCR产物纯化试剂(磁珠法)PCR Purification | |
凝胶回收试剂盒 | |
质粒 DNA 小量抽提试剂盒 |