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叶酸靶向修饰纳米红细胞膜包裹阿霉素FA/PEG-DOX-Nano-RBCs(纳米药物递释系统)

发布时间：2021-01-29 作者：axc 分享到：

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本研究采用低渗裂解法及纳米挤出工艺，制备了叶酸和聚乙二醇共同修饰的纳米红细胞膜药物载体，并以此负载盐酸阿霉素构建了一种具有长循环和药物靶向双重作用的新型纳米**递释系统（FA/PEG-DOX-Nano-RBCs）。该载药系统利用了红细胞膜的生物相容性， PEG 长循环作用及叶酸配体的**识别靶向特性，有望提高阿霉素的抗**药效，降低其毒副作用，

FA/PEG-DOX-Nano-RBCs的制取流程表图下图1已知,其实际上运营阶段以下几点:

（1）压积红細胞的分离出来

大鼠眼角冠状动脉丛取全血,4000 rpm抽滤分离10min弃去血浆和白神经组织层，建立4倍重量预冷的 PBS溶剂全面吹打，4000rpm抽滤分离10min弃上清，重在复以上操作方法3次，得出压积红神经组织。

（2）血影红血球系（ghost）的制取

取1mL 压积红血细胞核，放入4倍空间太低渗0.25×PBS 盐液体4 ℃孵育20 min （5 min 左右两相反一个），6000rpm 离心法10min，弃上清，再放入4倍空间太低渗PBS盐液体经常除垢一直到上清晶体，制备血影红血细胞核。

叶酸片配体表达整个过程制取

取相同之处体积太PBS专门配制的FA-PEG-DSPE 以 mPEG-DSPE氢氧化钠溶液填加以上备制的血影癌细胞膜中，于37℃摇床孵育1h，4000rpm离心式5min除去解离FA-PEG-DSPE及mPEG-DSPE，冶炼金属孕妇叶酸及PEG绘制后的血影红癌细胞膜。

（4）FA/PEG-DOX-RBCs的光催化原理

取1mL经孕妇叶酸遮盖的血影红血细胞，填加4倍比热容必定含量的DOX（混溶0.25×PBS）水饱和水溶液， 4℃条件下振摇孵育30min，填加换算比热容的10×PBS溶缩液，在常温振摇孵育90min。 6000rpm 抽滤10 min，弃上清，用 PBS 水饱和水溶液洗衣机清洗三回，足够弃去游离态 DOX，填加 4 倍比热容PBS水饱和水溶液，混匀，取到 FA/PEG-DOX-RBCs混悬液。

(5)FA/PEG-DOX-Nano-RBC的制备

取上面准备的 FA/PEG-DOX-RBCs 混悬液 5 mL，药用 20%电机功率传感器高周波5min，另一方面用于脂质一挤法使其从左到右利用 800 nm、 400 nm、 200 nm、 100 nm 外径的聚碳酸酯膜 21 次，得到 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混悬液。将FA/PEG-DOX-Nano-RBC 混悬液至于 5 mL 反渗透装置离心法式力管路， 6000 rpm离心法式力 10 min，甩去游离于 DOX，将反渗透装置离心法式力后得出的 FA/PEG-DOX-Nano-RBC 全新浮悬于 PBS溶剂中， 4 ℃阴凉处理于微波炉中紧急。