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一文了解:荧光FITC标记脂多糖/海洋硫酸多糖911
发布时间:2021-01-19     作者:zhn   分享到:

一文了解:荧光FITC标记脂多糖/海洋硫酸多糖911

FITC标记图片脂多糖的做法 :将 4mg脂多糖参加 2mL的0.5%三乙胺水悬浊液中 0℃ 打料20min,使脂多糖双链解离为单链成分。用 10 的1 mol·L 硫酸将其 酸碱值调节器为 5,那么参加含5mg的 FITC 的 0.1mol·L 磷酸钠水悬浊液 1.5mL(pH9.5),并 在 37~C下搅 拌孵育3h后,在4℃下将其混合型喂养物与磷酸钠水悬浊液齐全离心分离、 离-心后 ,去上清 即得FITC-脂 多糖 。 

FITC与壳聚糖接的制作步骤

在 10.0mL含 1% 壳聚 糖 的 0.1mol·L 乙酸磷酸铜盐溶液中,进入 10.0mL甲醇 ,再变缓加 入固定容积的 2.0g·L 的 FITC甲醇磷酸铜盐溶液 。常温暗处现象 3h后 ,用 0.2mol·L 氢氧化的钠奠定符号乙酰乙酸” 。 从褐藻中提炼起来的海洋能磷酸多糖911,基于其末段不 含氨基 ,FITC符号多糖的化 学炼制 现象分两 步 :

两步 :911-Tyr的合成:将 400mg911溶于 15mL0.2mol·L 的磷酸钾 缓冲液(pH8.0),然后依次加人 400mg酪胺和 150mg氰基 硼氢化钠,于 37℃下反应96h,间或振荡。反应完毕,离心分 离 ,将其上清液上 Sephadex G-25柱 ,用水 洗脱 收集 ,280llm 检测 ,收集**峰 ,冻干得 911-Tyr。

二步 :911-Tyr-FITC合成:

取 200mg911-Tyr不能溶解水 ,用 0.5mol·L~NaHCO3调 pH  8.5,后来进入 25mgFITC,于温度 、避 光下作用 留宿 ,再 向作用物中进入无水酒精酒精终氨水浓度为 80% ,产生大量亮黄 有机凝固挥发,抽滤弃去上清液。凝固加盐复溶 ,酒精再沉 淀,情况同上 ,反复 3次 ,得 911-Try-FITC,相结那步上 Sepha- dex G-25柱纯化,回收相关的水过柱酚类化合物冻干保持 。

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FITC标签 911-Tyr的措施


浙江pg电子娱乐游戏app 微生物给出的荧光符号多糖:

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