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一文了解:荧光FITC标记脂多糖/海洋硫酸多糖911
发布时间:2021-01-19     作者:zhn   分享到:

一文了解:荧光FITC标记脂多糖/海洋硫酸多糖911

FITC标记符号脂多糖的技巧 :将 4mg脂多糖注入 2mL的0.5%三乙胺悬浊液中 0℃ 交织20min,使脂多糖双链解离为单链节构。用 10 的1 mol·L 稀盐酸将其 pH缓解为 5,最后注入含5mg的 FITC 的 0.1mol·L 磷酸钠悬浊液 1.5mL(pH9.5),并 在 37~C下搅 拌孵育3h后,在4℃下将其交织物与磷酸钠悬浊液彻底清除剥离 、 离-心后 ,去上清 即得FITC-脂 多糖 。 

FITC与壳聚糖连入的制法技巧

在 10.0mL含 1% 壳聚 糖 的 0.1mol·L 乙酸稀磷酸中,假如 10.0mL甲醇 ,再变慢加 入很大表面积的 2.0g·L 的 FITC甲醇稀磷酸 。室内温度暗处反响 3h后 ,用 0.2mol·L 氢阳极氧化钠奠定标注乙酰乙酸” 。 从褐藻中导出出來的海上磷酸多糖911,因为其终端不 含氨基 ,FITC标注多糖的化 学炼制 反响分两 步 :

一点 :911-Tyr的合成:将 400mg911溶于 15mL0.2mol·L 的磷酸钾 缓冲液(pH8.0),然后依次加人 400mg酪胺和 150mg氰基 硼氢化钠,于 37℃下反应96h,间或振荡。反应完毕,离心分 离 ,将其上清液上 Sephadex G-25柱 ,用水 洗脱 收集 ,280llm 检测 ,收集**峰 ,冻干得 911-Tyr。

二步 :911-Tyr-FITC合成:

取 200mg911-Tyr不溶水 ,用 0.5mol·L~NaHCO3调 pH  8.5,进而下载 25mgFITC,于室内温度 、避 光下影响 過夜 ,再 向影响物中下载无水无水工业甲醇无水工业甲醇终氧化还原电位为 80% ,产生太大的量亮黄 黄绿色凝固进行析出,离心式弃去上清液。凝固加盐复溶 ,无水工业甲醇再沉 淀,状况同上 ,再次 3次 ,得 911-Try-FITC,齐头并进步骤上 Sepha- dex G-25柱纯化,分类整理应当水过柱类物质冻干保存图片 。

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FITC标志 911-Tyr的规则


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以上资料来自西安pg电子娱乐游戏app 生物小编zhn2021.01.19