脂质结构巨噬血细胞源头的外泌体miRNA可在体内和体外调节胰岛素敏感性
鉴定费巨噬人体细胞是否能分泌物miRNA:
(1)小室实验设计
中用声明书外泌体从供体人体肿瘤神经元施放后,能做到多巴胺多巴胺受体人体肿瘤神经元,且外泌体及及它人体内的快件均能被多巴胺多巴胺受体人体肿瘤神经元消除。将Cy3标签miR-233 mimic的转染进骨髓源性巨噬生殖细胞(BMDMS),第二步塑造于Transwell的上室,下室也不传达Cy3标识的3T3-L1乳酸細胞。共培养出12h后,在下室中观察植物得鲜红色荧光的Cy3-miR-233,是共培养出来前的6倍,呈现这不同肿瘤细胞间产生的媒质起了货物运输miRNA的帮助(图1)。在对应科学实验中,小编用Cy3一个人(不与miR-223相结合)办理BMDMs,在与一些BMDM共教育培养12小时英文后,得知一些荧光纺织染料在BMDMs中的导致可删去不计较,在3T3-L1脂质细胞核中没得染色剂有(图2)。对此,看来巨噬组织生殖细胞就可以代谢分泌组织生殖细胞外miRNA,植物的根被摄食到多余脂肪細胞中。
鉴定会ATM能否分泌外泌体:
关键在于填写脂质阻止巨噬血细胞(ATM)是否可以外泌体,从肥胖野生型小鼠的内脏脂肪组织(VAT)中分离出脂肪组织巨噬细胞(ATM)(CD11b+F4/80+),并培养72小时,电子显微镜(图4)和纳米观察分析(图5)显示,通过超速离心分离的颗粒含有丰富的ATM分泌的胞外小泡,其直径为30-100 nm。这些EV的密度梯度超速离心分析证实,它们主要由Exos组成,通过外体特异性蛋白标记物TSG101、syntenin1、CD63等的表达得到证明,主要以图6表示。
图3. 高速超速离心式破乳外泌体
图4.电镜观察外泌体**杯状囊膜结构
图5.NTA分析外泌体的粒径和浓度表征
图6.Westernblot鉴定TSG101等外泌体蛋白标志物
新产品生产商:胞外囊泡/细胞微粒/微囊泡/外泌体/EVs/exosomes
41860种蛋白质、2838种microRNA、3408种mRNA
外泌体中含RAB4, RAB5和 RAB11,RAB7 和 RAB9
热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90
以上所述设备仅使使用在研究,不能使使用在人体内应力测试!wyf 01.11