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质粒提取磁珠试剂盒 Plasmid extraction magnetic bead kit
发布时间:2022-09-19     作者:LYQ   分享到:
质粒获取磁珠微生物培养基盒英文音标称呼:Plasmid extraction magnetic bead kit本化学制剂盒选择含有奇特分離效用的磁珠和缓冲液软件系统,从原辅料中分刘海離纯化**质粒DNA,层次性包被的磁珠,在千万先决條件下对目地DNA含有比较强的亲和,而当先决條件转换时,磁珠施放吸的DNA,也是可以达成如何快速分離纯化DNA的目地。一整块全过程不有关有毒的化学制剂,卫生、便利、导入的DNA纯度提高。的使用本化学制剂盒纯化的基因组组DNA(OD260-OD320)/(OD280-OD320)均在1.7~2.0彼此,是可以应用领域到以及上中游原子核分子生物学学试验。适用性超范围可用在于多种质粒DNA的获取,可用在于自己化核酸获取平台网站。免疫试剂盒彩盒及包含

化学试剂盒成分

比例

裂解液S1

50ml

裂解液S2

20ml

通过液

50ml

磁珠

1.5ml*2

过柱液

20ml

的使用描述书

1份

图谱:

质粒提取磁珠试剂盒

特别留意细节1.菌苗一晚陪养OD值需做到0.1综上所述。2.磁珠用前很大要充足混匀。3.取包夜的培养的菌液离心力后,要吸走净上清,一旦违反有可能影向质粒纯净度。4.正个裂解环节方法要尽可能的清新,并在特殊要求日期内到位。5.若果菌液酸度较高,则推荐磁珠量可相当延长,以取得高酸度质粒。运营方式方法1.裂解取1-2ml(低备份质粒可出2-5ml)一晚的培养的菌液至1.5mlEP分液漏斗,12,000rpm抽滤1min,尽可能吸净上清,填加100μl Buffer A(高备份也可以50ul),自由振荡重悬菌体,以确保无菌检测块会产生。填加100μl Buffer B清新倒置混匀6~9次,至溶剂清澈见底所以,时期3min。填加75μl Buffer C立马清新倒置混匀6~9次,溶剂产生絮状沉淀自己,静置雪上2min以彻底的中合。12,000rpm抽滤10min。2.配合取上清于新的1.5mlEP管内,添加谐振混匀的磁珠5μl,异丙醇250μl(配备),上下颠倒混匀5min。将EP管放于磁性地上做磁区分,吸弃废弃物(吸净管盖及管底残液)。3.洗洁申请加入500μl洗衣液,柔美混匀1-2min,第二磁分离处理,吸净管盖及管底的残液;4.过柱环境温度阴干5min,假如100μl过柱液,迟缓全自动洗胃机混匀,65℃温浴10min。每间隔2~3min轻摇EP管好几分钟混匀。接下来磁拆分,心汲取上清液至新的EP管内,来在下游实验所。


种类困难及可以参考看法

最常见毛病

会的缘由

建议大家

得率低

肠子杆菌破裂

涂装iPad培植后,重选取新菌落来溶剂培植

未加抗菌素或抗菌素失灵造成质粒丟失

确保安全生产养育基富含正常、**的抗生素类

菌体含量太低

增大养成前菌体连通量或增大菌体征集(取2~5 ml菌体离心法),或查验抗生素类酸度有没有过高

提升菌体没在多数成不断前期

包存精力较长的茵种,需住宿塑造2~3次后操作

质粒再拷贝数低

致使用低拷入数平台导致的质粒DNA转化成量低,可更新有着相当功能表的高仿制数媒体

裂解不充分地

适用太多菌体的培养液,会引起菌体裂解不加以,可减低菌体容量或新增生化试剂的容量

盐溶液操作不力

BufferBBufferC在热度较低时或许经常出现尿液混浊,应放置37℃隔热保温一刻若能溶于为清亮的氢氧化钠溶液,能力动用

裂解准确时间偏长

添加BufferB后裂解准确时间不超越5分钟左右

综合不加以

运用进程必须使磁珠直到居于悬浮按钮情况,运用时非常严格是以情况产品说明

过柱液缩短

随着要求可相应提高冲洗掉液摄入量(≥30μl)增长质粒产量比


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